显微镜
更新时间:2016-10-11
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显微镜是人类各个时期zui伟大的发明物之一。在它发明出来之前,人类关于周围世界的观念局限在用肉眼,或者靠手持透镜帮助肉眼所看到的东西。
(1)镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。
(4)防热 防热的目的主要是为了避免热胀冷缩引起镜片的开胶与脱落。
部分获奖作品
一等奖作品:
《斑马鱼脑部的神经元与血管》
《凤舞九天》
作品简介:
本图为果蝇卵巢免疫荧光染色结果,由卵巢末端的germarium和其后连接的4个egg chamber组成。蓝色DAPI染料标记了egg chamber中正在发育的生殖细胞,红色标记了细胞骨架中的Hts蛋白,在egg chamber表面的卵泡细胞中有表达,绿色标记了核膜上表达的LaminC蛋白。该图展示了germarium中生殖干细胞的分布及其niche,对于我们研究干细胞的繁殖和分化调节有着重要作用
早在公元前一世纪,人们就已发现通过球形透明物体去观察微小物体时,可以使其放大成像。后来逐渐对球形玻璃表面能使物体放大成像的规律有了认识。
1590年,荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。
1611年
Kepler(克卜勒):提议复合式的制作方式。
1665年
Hooke(胡克):「细胞」名词的由来便由虎克利用复合式观察植物的木栓组织上的微小气孔而得来的。
1674年
Leeuwenhoek(列文胡克):发现原生动物学的报导问世,并于九年后成为*发现「细菌」存在的人。
1833年
Brown(布朗):在下观察紫罗兰,随后发表他对细胞核的详细论述。
1838年
Schlieden and Schwann(施莱登和施旺):皆提倡细胞学原理,其主旨即为「有核细胞是所有动植物的组织及功能之基本元素」。
1857年
Kolliker(寇利克):发现肌肉细胞中之线粒体。
1876年
Abbe(阿比):剖析影像在中成像时所产生的绕射作用,试图设计出的。
1879年
Flrmming(佛莱明):发现了当动物细胞在进行有丝分裂时,其染色体的活动是清晰可见的。
1881年
Retziue(芮祖):动物组织报告问世,此项发表在当世尚无人能*逾越。然而在20年后,却有以Cajal(卡嘉尔)为首的一群组织学家发展出染色观察法,此举为日后的显微解剖学立下了基础。
1882年
Koch(寇克):利用苯安染料将微生物组织进行染色,由此他发现了霍乱及结核杆菌。往后20年间,其它的细菌学家,像是Klebs and Pasteur(克莱柏和帕斯特)则是藉由下检视染色药品而证实许多疾病的病因。
1886年
Zeiss(蔡氏):打破一般可见光理论上的极限,他的发明--阿比式及其它一系列的镜头为显微学者另辟一新的解像天地。
1898年
Golgi(高尔基):*发现细菌中高尔基体的显微学家。他将细胞用硝酸银染色而成就了人类细胞研究上的一大步。
1924年
Lacassagne(兰卡辛):与其实验工作伙伴共同发展出放射线照相法,这项发明便是利用放射性钋元素来探查生物标本。
1930年
Lebedeff(莱比戴卫):设计并搭配*架干涉。另外由Zernicke(卓尼柯)在1932年发明出相位差,两人将传统光学延伸发展出来的相位差观察使生物学家得以观察染色活细胞上的种种细节。
1941年
Coons(昆氏):将抗体加上萤光染剂用以侦测细胞抗原。
1952年
Nomarski(诺马斯基):发明干涉相位差光学系统。此项发明不仅享有权并以本人命名之。
1981年
Allen and Inoue(艾伦及艾纽):将光学显微原理上的影像增强对比,发展趋于境界。
1988年
Confocal(共轭焦)扫描在市场上被广为使用。
■暗视野
暗视野由于不将透明光射入直接观察系统,无物体时,视野暗黑,不可能观察到任何物体,当有物体时,以物体衍射回的光与散射光等在暗的背景中明亮可见。在暗视野观察物体,照明光大部分被折回,由于物体(标本)所在的位置结构,厚度不同,光的散射性,折光等都有很大的变化。
■相位差
相位差的结构:
相位差,是应用相位差法的。因此,比通常的要增加下列附件:
(1) 装有相位板(相位环形板)的物镜,相位差物镜。
(2) 附有相位环(环形缝板)的聚光镜,相位差聚光镜。
(3) 单色滤光镜-(绿)。
各种元件的性能说明
(1) 相位板使直接光的相位移动 90°,并且吸收减弱光的强度,在物镜后焦平面的适当位置装置相位板,相位板必须确保亮度,为使衍射光的影响少一些,相位板做成环形状。
(2) 相位环(环状光圈)是根据每种物镜的倍率,而有大小不同,可用转盘器更换。
(3) 单色滤光镜系用中心波长546nm(毫微米)的绿色滤光镜。通常是用单色滤光镜入观察。相位板用特定的波长,移动90°看直接光的相位。当需要特定波长时,必须选择适当的滤光镜,滤光镜插入后对比度就提高。此外,相位环形缝的中心,必须调整到正确方位后方能操作,对中望远镜就是起这个作用部件。
■视频
将传统的与摄象系统,显示器或者电脑相结合,达到对被测物体的放大观察的目的。
zui早的雏形应该是相机型,将下得到的图像通过小孔成象的原理,投影到感光照片上,从而得到图片。或者直接将照相机与对接,拍摄图片。随着CCD摄像机的兴起,可以通过其将实时图像转移到电视机或者监视器上,直接观察,同时也可以通过相机拍摄。80年代中期,随着数码产业以及电脑业的发展,的功能也通过它们得到提升,使其向着更简便更容易操作的方面发展。到了90年代末,半导体行业的发展,晶圆要求可以带来更加配合的功能,硬件与软件的结合,智能化,人性化,使在工业上有了更大的发展。
■荧光
在萤光上,必须在标本的照明光中,选择出特定波长的激发光,以产生萤光,然后必须在激发光和萤光混合的光线中,单把萤光分离出来以供观察。因此,在选择特定波长中,滤光镜系统,成为极其重要的角色。
萤光原理:
(A) 光源:光源幅射出各种波长的光(以紫外至红外)。
(B) 激励滤光源:透过能使标本产生萤光的特定波长的光,同时阻挡对激发萤光无用的光。
(C) 萤光标本:一般用萤光色素染色。
(D) 阻挡滤光镜:阻挡掉没有被标本吸收的激发光有选择地透射萤光,在萤光中也有部分波长被选择透过。
■偏光
偏光是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种。凡具有双折射的物质,在偏光下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光。
(1)偏光的特点
将普通光改变为偏振光进行镜检的方法,以鉴别某一物质是单折射(各向同行)或双折射性(各向异性)。双折射性是晶体的基本特性。因此,偏光被广泛地应用在矿物、化学等领域,在生物学和植物学也有应用。
(2)偏光的基本原理
偏光的原理比较复杂,在此不作过多介绍,偏光必须具备以下附件:起偏镜,检偏镜,补偿器或相位片,无应力物镜,旋转载物台。
■超声波
超声波扫描的特点在于能够的反映出声波和微小样品的弹性介质之间的相互作用,并对从样品内部反馈回来的信号进行分析!图像上(C-Scan)的每一个象素对应着从样品内某一特定深度的一个二维空间坐标点上的信号反馈,具有良好聚焦功能的Z.A传感器同时能够发射和接收声波信号。一副完整的图像就是这样逐点逐行对样品扫描而成的。反射回来的超声波被附加了一个正的或负的振幅,这样就可以用信号传输的时间反映样品的深度。用户屏幕上的数字波形展示出接收到的反馈信息(A-Scan)。设置相应的门电路,用这种定量的时间差测量(反馈时间显示),就可以选择您所要观察的样品深度。
■解剖
解剖,又被称为实体或立体,是为了不同的工作需求所设计的。利用解剖观察时,进入两眼的光各来自一个独立的路径,这两个路径只夹一个小小的角度,因此在观察时,样品可以呈现立体的样貌。解剖的光路设计有两种: The Greenough Concept和The escope Concept。解剖常常用在一些固体样本的表面观察,或是解剖、钟表制作和小电路板检查等工作上。
■共聚焦
从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。共焦[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichroic mirror),将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在其焦点上有一个带有针孔(Pinhole),小孔就位于焦点处,挡板后面是一个 光电倍增管(photomultiplier tube,PMT)。可以想像,探测光焦点前后的反射光通过这一套共焦系统,必不能聚焦到小孔上,会被挡板挡住。于是光度计测量的就是焦点处的反射光强度。其意义是:通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。
■医学和生物学常使用的光学
有下列12种:
暗视野 在普通光学台下配一个暗视野聚光器(图4),来自下面光源的光线被抛物面聚光器反射,形成了横过视野而不进入物镜的强烈光束。因此视野是暗的,视野中直径大于 0.3m的微粒将光线散射,其大小和形态可清楚看到。甚至可看到普通明视野中看不见的几个毫微米的微粒。因此在某些细菌、细胞等活体检查中常常使用。
■场发射扫描电子
主要用途: 该仪器具有超高分辨率,能做各种固态样品表面形貌的二次电子象、反射电子象观察及图像处理。 具有高性能x射线能谱仪,能同时进行样品表层的微区点线面元素的定性、半定量及定量分析,具有形貌、化学组分综合分析能力。
仪器类别: 03040702 /仪器仪表 /光学仪器 /电子光学及离子光学仪器
指标信息: 二次电子象分辨率:1.5nm 加速电压:0~30kV 放大倍数:10-50万倍连续可调工作距离:5~35mm连续可调倾斜:-5°~45° x射线能谱仪: 分辨率:133eV 分析范围:B-U
附件信息: 镀金镀炭仪 ISIS图像处理系统背散射探头
场发射扫描电镜,由于分辨率高,为纳米材料的研究提供了可靠的实验手段。另外,对半导体材料和绝缘体,都能得到满意的图像,对超导薄膜,磁性材料,分子束外延生长的薄膜材料,半导体材料进行了形貌观察,并对多种材料进行了微区成份分析,均能得到满意的结果
金相参数:
规格: 1、目镜管
三目镜管:倾角30°,眼瞳调节范围 55mm-75mm
2、目镜:目镜:10(¢18mm)
3、五孔物镜转换器(一般四孔):
PL4X、PL10X、PL20X、PL40X、PL100X(可选购PL60X)
4、载物台
方台:150*200mm
移动范围:15*15mm
5、照明
柯勒照明、6V20W卤素灯、亮度可调
产品说明:
1、主体 1台
2、三目镜筒 1只
3、物镜:PL4X、PL10X、PL20X、
PL40X、PL100X 各1只
4、目镜:10X /18mm 1对
5、载物台压簧 1只
6、滤色片 2片
7、载物片:φ10、φ20 各1块
8、溴钨灯泡6V20W 2只
9、香柏油 1瓶
10、随机文件 1套
可选购配件:
目镜:12.5X目镜、10X平场分划目镜( 格值0.1mm)
物镜测微尺、80X物镜、50X物镜
采集卡、适配镜、图像分析软件、打印机、数码相机、摄像头
图像资料:
备注: MC006-5XB-PC金相主要用于鉴定和分析金属内部结构组织,它是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,该仪器配用摄像装置,可摄取金相图谱,并对图谱进行测量分析,对图象进行编辑、输出、存储、管理等功能。
规格: 图象适配镜:0.44倍
消色差物镜:4X 10X 40X 100X(油)
广角目镜: 10X 16X
聚光镜: 1.25NA
调焦范围: 25mm 微动格值:0.002mm
机械平台: 160×140mm
移动范围: 横向 70mm 纵向 50mm
光瞳间距: 55-75mm
卤钨灯泡: 6v/15w
电源: 220V 50Hz
产品说明:
1、主机 1台
2、三目镜筒 1只
3、消色差物镜:4X、10X、40X、100X(油) 各1只
4、目镜:10X、16X 各1对
5、滤色片(兰、黄、绿) 各1片
6、油镜油 1瓶
7、备用灯泡6V20W 1只
8、随机文件 1套
可选购:
图象适配镜
CCD:松下240, 480线
数码相机:索尼W5 500万像素
索尼W7 700万像素
图集卡 CG400
图像资料:
用途:用于生物学、细菌学、组织学、药物化学等研究工作以及临床度验之用。具有粗微动同轴的调焦机构,滚珠内定位转换器,亮度可调的照明装置,并带有摄影、摄像接口。
透反射式偏光,随着光学技术的不断进步,作为光学仪器的偏光,其应用范围也越来越广阔,许多行业,如化工的化学纤维,半导体工业以及药品检验等等,也广泛地使用偏光。XPV-213透射偏光就是非常适用的产品,可供广大用户作单偏光观察,正交偏光观察,锥光观察以及显微摄影,配置有石膏λ、云母λ/4试片、石英楔子和移动尺等附件,是一组具有较完备功能和良好品质的新型产品.本仪器的具有可扩展性,可以接计算机和数码相机。对图片进行保存、编辑和打印。
一)低倍镜、高倍镜的使用练习
1. 观察文字或字母装片:取一片字母装片,用低倍镜观察,反复练习对光、调光、标本放置和调节焦距等。如将玻片前后左右移动时,注意物像与玻片移动方向是否一致,玻片上的字母是正像还是反像,为什么?
2. 观察羊毛片(或头发)交叉装片:取一张毛(发)交叉装片,先用低倍镜观察,找到两根毛(发)后,再将毛(发)交叉点移到视野中央,然后换高倍镜观察,再轻微转动细调节器,观察不同层次,判定哪条毛(发)在上方,哪条位于下方。
(二)油镜的使用练习
1. 取一张血涂片或取血一小滴,滴于清洁的载玻片一端,另取一张边缘平整的载玻片,按照图1-3所示做成血涂片。先用低倍镜再用高倍镜进行观察。
图1-4 蛙血涂片 图 1-5 运动神经细胞
2. 用油镜观察,并分辨红细胞、白细胞和淋巴细胞,比较三种物镜的放大倍数和分辨率。
3. 观察兔脊神经节切片(示固定染色的细胞)
取兔脊神经节切片标本先在调好光线的低倍镜下观察(固定染色的标本需调较亮光线),低倍镜下找到要观察的标本,为淡紫色的神经节切面,在其外围包有被膜,且向内伸入,形成神经节的结缔组织支架,节内有许多大小不等的神经细胞,呈散在分布。然后转换高倍镜,选择完整而清晰的圆形
图 1-6感觉神经细胞
神经细胞仔细观察其内部结构。可见到在细胞中央有一圆形核,核内有着色为深紫红色的圆形核仁及染色质颗粒,核与细胞膜之间是均匀浅紫色的细胞质,在细胞的外面围有若干个被囊细胞,它起保护神经细胞的作用。在神经细胞之间还可看到有轴索横断面和许多神经纤维,多呈交错排列。
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图1-3血涂片的制备方法
4. 观察完毕,务必将油镜按正确方法擦净。
目前在生物学和医学研究中,常用的,还有以下几种:
1. 双筒解剖:解剖较小标本或观察玻片标本的全貌时,需使用解剖,以观察自然状态下较小的实体(正像)和较大的玻片标本,或解剖细小生物。
2. 相差:活细胞在普通光镜下,一般不能分辨其细微结构。这是由于各细微结构的折光性很近似或对比不够显著的缘故。相差则是在聚光器下装一个环状光栏,其物镜是安有相板的相差物镜。环状光栏的作用是造成空心的光线锥,使直射光和衍射光分离。相板的作用是使直射光和衍射光发生干涉,导致相位差变成振幅差(即明暗差),使反差加强。所以,可以观察活细胞中不同染色的微细结构。
3. 倒置:物镜位于标本的下方,而光源位于标本的上方。主要用于细胞培养时观察培养瓶中细胞的生长情况。